人基质金属蛋白酶4(MMP-4)检测试剂盒
规格:96T/48T
用途:用于检测血清、血浆、细胞培养上清液等样本中人基质金属蛋白酶4(MMP-4)的浓度。
使用前请仔细阅读说明书。如果有任何问题,请联系我们
具体保质期请见试剂盒外包装标签。请在保质期内使用试剂盒。联系时请提供产品货号、生产日期(见盒签),以便我们更高效为您服务。
【试剂盒性能】
物理性能:各液体组分澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装,无破损漏气。
校准曲线线性:校准品剂量反应曲线相关系数 r 值,大于等于 0.9900。精密度:批内变异系数 CV%小于 10%;批间变异系数 CV%小于 15%。
回收率:回收率在 85%-115%之间。
敏感性:本试剂盒识别人基质金属蛋白酶4(MMP-4),与结构类似物无交叉。
稳定性:2℃-8℃保存,有效期 6 个月。
【实验原理】
人基质金属蛋白酶4(MMP-4)检测试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中指标表达。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中指标相结合,经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)与待测样品中人基质金属蛋白酶4(MMP-4)的浓度呈正相关。拟合校准品曲线,可以计算出样本中人基质金属蛋白酶4(MMP-4)的浓度。
【试剂盒组成】
注意:
1、使用前请检查试剂盒中试剂的标签和数量与表格是否一致。
2、试剂盒 2-8℃保存,不得使用过期试剂盒。
3、包被微孔板单次未使用完,要谨记密封放到 2-8℃保存。
4、如果试剂盒的组份需要再次使用,请确保上一次使用之后没有被污染。
【样品的准备和保存】
以下只是列出样品采集和保存的一般指南。所有样本采集保存过程中, 不得使用叠氮钠做为防腐剂。样品如果不立即分析,应分装后冷冻保存, 且避免反复冻融。
细胞培养上清:离心去除沉淀,立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
血清:用干净试管收集血液,室温凝固 30 分钟,离心 2000×g 20 分钟,收集血清。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
血浆:采用肝素、柠檬酸盐或 EDTA 抗凝,抽血后 30 分钟内在2-8℃离心 2000×g 20 分钟。为消除血小板的影响,建议在 2-8℃进一步离心 10000×g 10 分钟。立即分析或分后-20℃冷冻保存。
细胞裂解液:对于贴壁细胞,去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。加入适量裂解液,用移液器吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常 10 秒后,细胞就会被裂解。对于悬浮细胞,离心收集细胞,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。加入适量裂解液,用移液器吹打把细胞吹散,用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后,10000—14000×g 离心 3-5 分钟, 取上清。立即分析或分装后-20℃ 冷冻保存。
尿液:用无菌管收集,离心 2000×g 20 分钟。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
【注意事项】
1、本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断。
2、试验中请穿着实验服并戴乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液样品时,请按国家生物试验室安全防护条例执行。
3、严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温 20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
4、洗板不正确可能导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
5、消除板底残留的液体和手指印,否则影响 OD 值。
6、底物显色液应呈无色或很浅的颜色。
7、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
8、在储存和温育时避免强光直接照射。
9、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
10、任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
11、检测使用的酶标仪需要安装能检测 450±10nm 波长的滤光片,
光密度范围在 0-3.5 之间。建议使用时提前 15 分钟预热。
12、请勿使用其他批号或其他来源的试剂混合或替代本试剂盒中的试剂。
13、试验中所用的 EP 管和吸头均为一次性使用,严禁混用。
14、请勿使用过期的试剂。
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