详细信息

　　【检验原理】
 

　　木瓜源性成分(Papaya)荧光定量PCR试剂盒可用于检测食品或其他材料中是否有木瓜的成分。现代食品加工工艺极大改变了食材原有的味道、气味、色泽、纹理和质地等特性，因此传统的感官鉴别技术已经无法对食材的真伪进行准确的鉴定。同时部分食材还有致敏性，因此基于基因检测的快速灵敏的食材来源检测技术将对食品监管和安全提供重要的保障。​　​​
 

　　【储存条件及有效期】
 

　　-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融少于 7 次，有效期 12 个月。
 

　　【适用仪器】
 

　　ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

 

　　1.1 结果判断
 

　　阳性：检测通道 Ct 值≤35.0，且曲线有明显的指数增长曲线。
 

　　可疑：检测通道 Ct 值>35.0，且出现典型扩增曲线的样本建议重复试验，重复试验结果出现 Ct 值≤35.0 和典型扩增曲线者为阳性，否则为阴性。
 

　　阴性：样本检测结果无 Ct 值且无明显的扩增曲线。
 

　　2. 检测方法的局限性
 

　　a. 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
 

　　c. 阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
 

　　f. 试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；
 

　　g. 本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
 

　　1.1 DNA 提取
 

　　1) 对上述处理好的标本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL 核酸提取液)， 100℃恒温处理 10min，13,000 rpm 离心 5min，取上清液转移至新的 1.5mL EP 管，-20℃保存；
 

　　2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生产的DNA 提取试剂盒(离心柱提取法)，请严格按照试剂盒说明书进行操作。
 

　　在使用荧光PCR试剂盒过程中，需要注意以下几个方面：
 

　　1. 保持实验室洁净，避免外界杂质的污染影响结果。
 

　　2. 在进行样品转移和控制组合过程中，要避免交叉污染，尽量避免手工错误和环境影响。
 

　　3. 正确设置PCR反应条件：在设置PCR反应条件时，要根据样品类型和PCR所需片段大小等因素来确定条件，并且确保反应温度和时间都是正确的。
 

　　4. 严格遵守操作规程，遵循实验室标准操作程序，以确保实验准确、可靠。
 

　　5. 在荧光PCR实验的数据处理中，应坚持严格的数据分析流程，并詹析实验结果。

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