详细信息

产品介绍

西尼罗病毒（WN）IgM抗体ELISA检测试剂盒

仅供科研使用

用途

西尼罗(WN)病毒IgM ELISA，利用了西尼罗重组抗原检测人体血清或血浆中的西尼罗抗体。本实验仅用于辅助诊断人感染了西尼罗病毒，不用于筛查血液或血液成分。仅供专业人员体外诊断使用。

概述

 感染了西尼罗病毒会导致包括脑炎等一系列症状的疾病，西尼罗病毒在世界广泛传播，已在50多个国家检测出该病毒。本试验经CDC提供的试剂检验与验证。本试验使用了一种称为WNRA的重组抗原，它可以作为西尼罗病毒感染的快速血清学指标，WNRA蛋白是一种重组抗原，它是由含有西尼罗病毒两个抗原的序列多肽构成。

实验的原理

检测西尼罗病毒IgM ELISA 是基于两步夹心法原理制造的。

提供的材料

1.        微孔板（96孔 12x8）：即用  每孔均包被结合西尼罗重组抗原的单抗。2－8℃下保存至保质期。

注意：WNRA和NCA已包被于微孔板。

2.        IgM样品稀释液：1支 25ml 即用 2-8℃下保存至使用。

3.        IgM阴性质控：1支 30ul  2-8℃下保存至使用。要长时间储存，将其分装于小瓶里，在-70℃下储存。

4.        IgM阳性质控：1支 30ul  2-8℃下保存至使用。要长时间储存，将其分装于小瓶里，在-70℃下储存。

5.        洗涤液（10X）：1瓶 120ml  2－8℃下保存至使用。

6.        EnWash：1瓶 20ml 2－8℃下保存至使用。

7.        酶联物：一瓶6ml 即用 2－8℃下保存至使用。

8.        TMB底物液： 1支 9ml 即用  2－8℃下保存至使用。

9.        终止液；1支6ml 即用  2－8℃下保存至使用。

试剂应避免反复冻融。

操作步骤

在使用前将所有试剂和样品平衡至室温，并轻轻倒转使其充分混匀。

实验准备：

将10X的浓缩洗涤液稀释,将120ml的浓缩洗涤液加上1080ml的蒸馏水，摇匀，至无任何沉淀，稀释好的洗涤液多可在室温下放置两个星期。

准备实验所需的板条，剩余的板条应尽快放入袋子里重新密封，在2－8℃下储存至保质期。

操作步骤：

1.     标记将要使用的板条，注意微孔板已经按照统一排列，如下所述包被西尼罗抗原和质控抗原。

解释结果

1.  样品的ISR值大于3.0视为阳性。

2.  阳性结果需重做证明。

3.  样品的ISR值小于2.0视为阴性。

4.  样品的ISR值小于3.0但是大于2.0，视为未确定，但是很有可能阳性，实验需一式三份重做。

5.  ISR值大于2.0是因为WNRA和NCA的值都低造成的，应该视为潜在假阳性。

样品1低OD值的范例：
计算样品的WNRA和NCA值：

平均WNRA=0.060/2=0.030

     NCA=0.026/2=0.013

     ISR=0.030/0.013=2.31

虽然样品的ISR值高于2.0，但是本样品需视为假阳性，因为其OD值低，而且远远偏离了相关的标准品，这通常在空白值高的情况下发生。

要进一步证实样品，所有阳性的结果都要用6，2层析稀释滴定法重做，与相同滴定法的阴性质控相比较，假如曲线是？？的，平的或者是波浪型的曲线，则表明为假阳性的结果。

实验的局限性

1.  样品的OD值高于抗原质控（非WNRA）,导致ISR值小于3.0，则可能为假阴性，再释稀样品重新实验，可能会获得真正的ISR值。

2.  既然这不是一个直接检测的方法，则需考虑假阳性和假阴性存在的可能性。

3.  所有有反应的样品，应用确定性实验来证实。

4.  本实验提供的试剂，尽可能地检测血清或血浆中的WNRA反应性抗体水平。

5.  应避免反复冻融样品和试剂。

6.  不要使用溶血或脂血的样品，它们会导致错误的结果。

本译文仅供参考，详情请以原文为准

      Focus诊断公司是美国大的诊断公司 Quest公司旗下的子公司。 该公司向医学中心、医院及商业实验室提供参考检测服务。

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