甲肝病毒抗体(HAV-IgG)elisa检测试剂盒
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详细信息

产品介绍

甲肝病毒抗体(HAV-IgG)elisa检测试剂盒

本试剂仅供研究使用 标本:血清或血浆

试验原理:

HAV-IgG试剂盒是间接法酶联免疫吸附实验(ELISA)。已知HAV-IgG浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将HAV-IgG和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中HAV-IgG的浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制

星状病毒检测试剂盒(ELISA)
一次性使用静脉留置针
疟原虫抗原检测试剂盒(美国Cortez)

 

试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制
96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型
塑料膜板盖1块半块即用型
标准品:40IU/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀
空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型
标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型
生物素标记的抗HAV-IgG抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型
亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型
洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释
底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型
底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型
终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型
标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型 

自备材料

1. 蒸馏水。

2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3. 振荡器及磁力搅拌器等。 

安全性

1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项

1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8. 加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 

样品收集、处理及保存方法

1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液

5、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 

试剂的准备

1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:

 

40 IU/L(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
20 IU/L(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
10 IU/L(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
5.0 IU/L(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
2.5 IU/L(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
1.25 IU/L(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0 IU/L(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。

2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。

操作步骤

1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。

3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。

4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。

8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。 

建议使用的实验方案

 

 标准品浓度(IU/L) 
A4040样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品
B2020样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品
C1010样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品
D5.05.0样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品
E2.52.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品
F1.251.25样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品
G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品
H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品

局限

6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。

试剂盒性能

1. 灵敏度:小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性:不与其它细胞因子反应。

3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。 

结果判断与分析

1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的HAV-IgG标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的HAV-IgG含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围:0-40IU/L

4、敏感度: 0.1 IU/L

 

公司优势:
1)质量:我司提供的的试剂均经过出厂检测。不对可退换
2)价格:价格实惠,量大从优,产品价格随时会变动,实时报价还请来电获取。
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除了甲肝病毒抗体(HAV-IgG)elisa检测试剂盒我公司还提供:

登革热&寨卡病毒联检试剂盒
寨卡病毒IgG ELISA检测试剂盒
寨卡病毒IgM ELISA检测试剂盒