1、如果有N个样品，标记N+2个1.5-2mL螺旋盖塑料离心管，多出的一个为阳性对照，一个为阴性对照。为避免污染，建议不要使用压盖式塑料离心管。在每个管上做个标记，以在后续操作时区别向心面和离心面。然后在离心管中分别加0.2mL液体样品（血清、血浆、尿液、脑脊液、唾液、眼泪等），阳性对照和阴性对照。

1.1、如果是口腔拭子、咽喉拭子等各种拭子样品，则将拭子放入0.2mL自备生理盐水中挤压出液体，然后取0.2mL进行提取。

1.2、如果是粪便等半固定样品，则取约0.3mL的样品，加入0.3mL自备生理盐水。震荡重悬，离心取0.2mL上清进行提取。

1.3、如果血液，细胞培养液等含细胞的液体。可以离心用上清，也可以直接取 用，但后者提取的病毒DNA中会有少量细胞的基因组DNA污染（但不影响PCR）。血浆的抗凝剂必须是EDTA或ACD，不能是肝素。使用ACD时由于所加入ACD会增加体积，样品会被稀释。得到的病毒滴度会比使用EDTA低15%左右。血浆按0.6mL/管的量分装保存，以避免反复冻融。

1.4、如果样品是实体组织或培养细胞，则需要在自备生理盐水中匀浆后离心， 用0.2mL上清液（含病毒）进行提取，但此种情况下后得到的病毒DNA不可避免的会含有少量基因组DNA污染（但不影响PCR检测）。

1.5、如果液体样品中的病毒需要富集，可以使用1.5mL上述方法得到的液体在4℃24000g冷冻离心60分钟，移弃1.3mL、用剩下的0.2mL继续操作。

2、加入0.6mLDNA 病毒裂解液到各离心管中，振荡30秒混匀后室温放置10分钟裂解病毒。注意：DNA病毒裂解液在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在 65℃水浴使沉淀溶解并充分摇匀后再取用。

3、加入0.8mL上柱结合液到离心管中，颠倒混匀后转移一半的混合液（0.8mL） 到离心吸附柱中，室温放置2分钟。

4、12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集 管中。

5、将剩余的另外一半裂解液（0.8mL）转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟。

6、12000rpm 室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集 管中。

7、加入0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中。12000rmp室温离心1分钟。弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。

8、加入0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中。12000rmp室温离心1分钟。弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。此为第二次洗涤，可以跳过。

9、12000rpm室温离心1分钟（干甩），弃含穿透液的离心管。

10、将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的RNase-free的1.5mL离心管中。在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100uL DNA洗脱液3.0，然后室温放置2分钟。

11、12000rpm室温离心1分钟，离心管中的溶液即为病毒DNA溶液。

12、DNA样品可以直接用于PCR，也可放-20℃长期保存。